抗坏血酸过氧化物酶(APX)试剂盒

产品名称 抗坏血酸过氧化物酶(APX)试剂盒

产品说明：
APX是抗坏血酸代谢的关键酶之一，也是植物清除活性氧的重要抗氧化酶之一。APX于叶绿体、胞质、线粒体、过氧化物和乙醛酸体，以及过氧化体和类囊体膜上分别具有多种同功酶。APX是植物AsA的主要消耗者，它可以催化H2O2氧化AsA。在胁迫和解胁迫条件下，APX 与 AsA 具有一定的负相关性，APX的活性可以直接影响AsA的含量。APX催化H2O2氧化AsA，通过测定AsA的氧化速率，可计算得APX活力。实验需要低温离心机、紫外分光光度计、1ml石英比色皿、研钵、移液枪、冰和蒸馏水等仪器和试剂：。
操作步骤：
一、粗酶液提取：
组织质量（g）为例：试剂的体积(ml)为1：5~10的比例（建议称取约0.1g组织，加入1ml 试剂A）在冰水浴中匀浆。13000g，4℃离心20min，取上清放在冰上待测。
二、测定操作表：
1. 分光光度计需提前预热30min以上，调节波长到290nm，用蒸馏水调零。
2. 试剂A需要在25℃中预热30min以上。
3. 测定管：在1ml石英比色皿中依次加入100μl上清液、700μl预热的试剂A、100μl试剂B 和100μl试剂C，快速混合均匀后在290nm测定10s和130s光吸收A2和 A1，△ A=A2-A1。
APX 活力计算：
(1)按样本蛋白浓度计算活性
单位定义：1U=每毫克蛋白每分钟氧化1μmolAsA。
APX(μmol/min/mgprot)=△A÷(ε×d）×V 反总×106÷(Cpr×V 样)÷T =1.79×△A÷Cpr
（2）按样本质量计算
单位的定义：1U=每g组织每分钟氧化1μmolAsA。
APX(U/g)=△A÷(ε×d）×V 反总×106÷(W×V 样÷V 样总)÷T=1.79×△A÷W ε：AsA 在 290nm 处摩尔吸光系数为 2.8×103L/mol/cm；d：比色皿光径（cm），1cm；V 反总：反应体系总体积（L），1000μl=1×10-3L；106：1mol=1×106μmol；V 样：加入反应体系中上清液体积（mL），100μl=0.1ml；V 样总：加入提取液体积，1ml；W，样本质量，g；T：催化反应时间（min），2min。
注意事项：试剂配制好后需4℃保存，并且在3天内使用完。

本产品只适用于科研，不能用于临床诊断。严禁用于临床医疗及其他非科研用途！以实际收货产品说明书为准，网站说明书仅供参考。