产品规格:10ml 50ml
保存条件:4℃保存,有效期 12 个月。
简介
台盼蓝(Trypan blue)又称锥蓝或锥虫蓝等,分子式为 C34H24N6Na4O14S4,MW: 960.81,CAS:72-57-1,是一种阴离子型染料。Trypan blue 不能透过活细胞正常完整的细胞膜,故活细胞不着色,即产生所谓的拒染现象,而死亡细胞的细胞膜通透性增加,可使染料通过细胞膜进入细胞内,使死细胞着色呈蓝色,是最常用的检测细胞活率的方法。通常认为细胞膜完整性丧失,即可认为细胞已经死亡,这与中性红作用相反。因此,借助台盼蓝染色可以非常简便、快速地区分活细胞和死细胞。台盼蓝是组织和细胞培养中最常用的死细胞鉴定染色方法之一。此溶液为 1%台盼蓝染色液,0.4%为最常用的浓度。
使用说明:
1. 收集细胞:
如果收集贴壁细胞,应用胰蛋白酶-EDTA 溶液消化细胞,收集细胞。如果收集悬浮细胞,则可以直接收集细胞。收集好的细胞在 1000~2000g 离心 1min,弃上清,用 1ml PBS 重新悬浮细胞沉淀。
2. 台盼蓝染色:
吸取 100μl 细胞悬液到 1.5ml 或 0.5ml 离心管内,加入 100μl Trypan blue stain (0.4%) 轻轻混匀,静置染色 3min (染色时间可适当延长,但不宜超过 10min)。
3. 细胞计数:
吸取经过染色后的细胞,用血细胞计数板计数。通常如果要比较 地进行定量,每个细胞样品至少需要数 500 个细胞,数出蓝色细胞和细胞总数。细胞存活率计算公式如下:细胞存活率=(细胞总数-蓝色细胞数)/细胞总数×
注意事项:
1. Trypan blue stain 对人体有轻微毒性,请注意小心防护。
2. 注意凋亡小体偶尔也有台盼蓝拒染现象。
3. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
只适用于科研,不能用于临床诊断。严禁用于临床医疗及其他非科研用途!以实际收货产品说明书为准,网站说明书仅供参考。