DAB显色试剂盒（20×）

DAB kit (20×)

包装规格:
用法：
1. 临用前配制 10 mL 1×DAB 显色工作液：将 0.5 mL 20× DAB 显色液 A 加入 9 mL 1×PBS 中并涡旋混匀。向 DAB / PBS 混合物中加入 0.5 mL 20×DAB 显色液 B 涡旋混合均匀。 可以根据需要按比例缩放体积。 注意：不要使用含有叠氮化钠的缓冲液，叠氮化钠是一种 HRP 抑制剂。
2. 在样品的 一次洗涤完毕后，去除洗涤液，加入足够 的 DAB 显色工作液，确保能充分覆盖样品。室温避光孵育 3-30 分钟或更长时间，直至显色达到预期深浅。免疫印迹实验，应保证样品在一个足够多的染色液中且能被自由晃动。
3. 去除 DAB 染色工作液，用 PBS 冲洗样品几次以中止显色反应。对于用显微镜观察的细胞或组织样品，可复染样品（可选）并安装在水性封固介质中。或者，可以将样品脱水并安装在有机封固剂中。免疫印迹实验，可将样品用水冲洗，风干，然后在室温下储存。
储存与运输：
-20℃避光密闭保存，一年有效。避免反复冻融。
2~8℃运输，在途时间 5 天对试剂无影响。
注意事项
1. DAB 对人体有害，操作时请小心，并注意有效防护以避免直接接触人体或吸入体内。
2. 显色工作液应现用现配，新鲜配制的工作液应为无色或浅棕色，如颜色过深，请勿使用。
3. 显色时间严格控制，根据情况调整，以免显色过度。固相膜显色数小时后即会褪色，不能 存在。
4. 请将沾有 DAB 显色液 A 的容器等放在含有 3% KMnO4，2% NaHCO3 的溶液浸泡 3h，以减少污染。
5. 本产品 于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或 ，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。
6. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
常见问题与分析
1. 背景显色太深。
a. 在免疫组化时如果背景显色太深，一方面需考虑使用适当的封闭液进行封闭，例如选购适当的封闭液或使用和一抗相同来源的血清(10%)进行封闭。另一方面，请注意选购经过适当吸附的二抗，以减少二抗的非特异性吸附。
b. 在免疫组化时如果背景显色太深，需注意灭活内源性过氧化氢酶。
c. 可以考虑缩短显色时间，或降 低 二 抗 浓 度。
d. 选择适当强度的洗涤液，或延长洗涤时间。
2. 没有显色或显色太弱。
a. 可以考虑适当提高一抗或二抗的浓度。检测二抗效果，滴一滴稀释二抗在膜上，检测二抗是否可以被正常显色。
b. 可以考虑使用更加灵敏的放大检测体系，例如使用生物素检测体系。
c. 可以适当延长显色时间，另外确定抗原修复是否对于使用的一抗是必需的。