产品规格:5×20ml  5×50ml

保存条件:4℃避光保存，有效期 12 个月。

简介

微丝染色液 (R25 法) 主要显示由微丝构成的应力纤维，由于细胞对细胞基质的附着和维持扁平铺展的形状，该纤维在体外培养的贴壁细胞中尤其发达。考马斯亮蓝 R250 染色微丝并非特异性的，因为 R250 可以对多种蛋白质染色。因此能够看到的纤维主要是由微丝组成的应力纤维。
组成：

使用说明：
(一) 动物细胞微丝
1. 取材：在盖玻片上细胞培养，生长密度达 60～70%时细胞面朝上置于称量瓶中。用1×PBS buffer 清洗 1min，重复 1 次。
2. 抽提：弃 PBS buffer，加入 2ml TM buffer，盖上称量瓶盖子，37℃处理 25～30min。
3. 漂洗：弃 TM buffer，用 1×M buffer 清洗 2min，重复 2 次。
4. 固定：稍微晾干，加入 2ml Microfilament fluid，固定细胞 15～20min。
5. 冲洗：弃 Microfilament fluid，用 1×PBS buffer 轻轻清洗 2min，重复 1 次。
6. 染色：弃 PBS buffer，把盖玻片立于吸水滤纸上吸去边缘水分，加入 2ml R250 staining solution，染色 20～25min。7. 去离子水冲洗染液，滤纸吸干水分，晾干，镜检或树脂封片。
(二) 植物细胞微丝
1. 轻轻撕取约 1cm2
洋葱鳞茎内皮，置于预先加入 1×PBS buffer 的称量瓶中，孵育 5～10min，使其下沉。
2. 抽提：弃 PBS buffer，加入 2ml TM buffer，盖上称量瓶盖子，37℃处理 30min。
3. 漂洗：弃 TM buffer，用 1×M buffer 清洗 3～5min，重复 2 次。
4. 固定：稍微晾干，加入 2ml Microfilament fluid，固定细胞 20～25min。
5. 冲洗：弃 Microfilament fluid，用 1×M buffer 清洗 3～5min，重复 2 次。
6. 染色：弃 PBS buffer，把盖玻片立于吸水滤纸上吸去边缘水分，加入 2ml R250 staining solution，染色 20～25min。
7. 去离子水冲洗染液，标本铺在载玻片上，加盖玻片，镜检。
染色结果：
动物细胞应力纤维：深蓝色
植物细胞应力纤维：深蓝色
注意事项：
1. 动物细胞微丝染色时，向称量瓶中加入试剂应缓慢，避免直接滴到玻片或样本上。
2. 清洗细胞动作应轻柔，避免细胞脱落。
3. 抽提时间应自行摸索，时间过长易破坏细胞结构，时间过短易出现高背景。
4. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

只适用于科研，不能用于临床诊断。严禁用于临床医疗及其他非科研用途！以实际收货产品说明书为准，网站说明书仅供参考。