DKK-1简介:
Dickkopf相关蛋白包含Dkk-1,2,3,4,这是 个被确认的Dickkopf家族成员,并作为诱导剂在非洲爪蟾头部被发现。Dkk蛋白包括两个富含半胱氨酸的结构域,C端结构域有10个半胱氨酸残基,可以帮助蛋白质折叠,在Wnt抑制中起到必要和必不可少的作用。成熟的人Dkk-1是一种40kDa糖蛋白,与小鼠、大鼠、牛和兔Dkk-1的分别为86%、87%、91%和90%同源性。在成人中,Dkk-1主要在成骨细胞和骨细胞中表达。
出生后,Dkk-1主要由成骨细胞和骨细胞表达。Dkk-1的高表达已被证明在骨侵蚀的情况下可能是致病的,如类 风 湿 性 关 节 炎、多 发 性 骨 髓 瘤、佩吉特病和糖皮质激素诱导的骨 质 疏 松 症。Dkk-1还通过控制黑素细胞中的Wnt信号调节皮 肤 色 素 沉 着和厚度。通过抑制Dkk-1活性激活Wnt可能是致癌转化的一个因素,例如,在乳腺上皮细胞转化或人类结 肠 癌中通过癌基因c-myc。Dkk-1也在血小板中表达。血小板Dkk-1的释放发生在血小板活化过程中,包括血清样本采集过程中的凝血。据推测,Dkk-1在血小板介导的内皮细胞活化导致斑块形成中发挥作用。
检测原理:
本试剂盒采用双抗体夹心ELISA法检测样本中DKK-1 的浓度。DKK-1 捕获抗体已预包被于酶标板上,当加入标本或参考品时,其中的DKK-1 会与捕获抗体结合,其它游离的成分通过洗涤的过程被除去。当加入生物素化的抗人DKK-1 抗体后,抗人DKK-1 抗体与DKK-1 接合,形成夹心的免疫复合物,其它游离的成分通过洗涤的过程被除去。随后加入辣根过氧化物酶标记的亲合素。生物素与亲合素特异性结合,亲合素连接的酶就会与夹心的免疫复合物连接起来;其它游离的成分通过洗涤的过程被除去。 加入显色剂,若样本中存在DKK-1 将会形成免疫复合物,辣根过氧化物酶会催化无色的显色剂氧化成蓝色物质,在加入终止液后呈黄色。通过酶标仪检测,读其450nm处的OD值,DKK-1 浓度与OD450值之间呈正比,通过参考品绘制标准曲线,对照未知样本中OD值,即可算出标本中DKK-1 浓度。
人DKK-1参考标准曲线
注意:本图仅供参考,应以同次试验标准品所绘标准曲线计算标本含量。
灵敏度,特异性和重复性:
1.灵敏度:多次重复结果表明,最小检出量为57.9pg/ml。
2.特异性:与人Dkk-4,Kremen-1,Kremen-2,LRP-6等没有交叉反应。
3.重复性:板内,板间变异系数均<10%.
只适用于科研,不能用于临床诊断。严禁用于临床医疗及其他非科研用途!以实际收货产品说明书为准,网站说明书仅供参考。
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