OPG简介:
骨保护素(OPG),也称为破骨细胞生成抑制因子(OCIF),是一种分泌的55~60kDa蛋白质,调节骨密度。作为肿 瘤 坏 死 因 子受体(TNFR)蛋白质超家族的一员,它被命名为TNFRSF11B。人类OPG cDNA编码401个氨基酸,包括21个aa信号肽和380个aa成熟可溶性蛋白,它们通过肽间的Cys形成一个110ka的分泌的同源二聚体。成熟的人OPG与小鼠、大鼠、马、狗和牛OPG的氨基酸序列同源性分别为86%、87%、92%、92%和88%。OPG作为同型二聚体被间充质干细胞、成纤维细胞和内皮细胞广泛表达和组成性释放。
在成骨细胞内,OPG的基本结构域与高尔基体中的RANK L相互作用抑 制rank l 分 泌。在细胞外,OPG与RANK L结合导致两种蛋白质的网格蛋白介导的内化和降解。多 发 性 骨 髓 瘤细胞上的syndecan1硫酸肝素结合OPG也会导致OPG内化和降解,导致骨质流失。OPG缺乏可导致人类青少年佩吉特病,OPG的不足就不能抗衡与RANK L和RANK结合的效应,可导致小鼠和人类骨 质 疏 松和血 管钙化。
检测原理:
本试剂盒采用双抗体夹心ELISA法检测样本中OPG 的浓度。OPG 捕获抗体已预包被于酶标板上,当加入标本或参考品时,其中的OPG 会与捕获抗体结合,其它游离的成分通过洗涤的过程被除去。当加入生物素化的抗人OPG 抗体后,抗人OPG 抗体与OPG 接合,形成夹心的免疫复合物,其它游离的成分通过洗涤的过程被除去。随后加入辣根过氧化物酶标记的亲合素。生物素与亲合素特异性结合,亲合素连接的酶就会与夹心的免疫复合物连接起来;其它游离的成分通过洗涤的过程被除去。 加入显色剂,若样本中存在OPG 将会形成免疫复合物,辣根过氧化物酶会催化无色的显色剂氧化成蓝色物质,在加入终止液后呈黄色。通过酶标仪检测,读其450nm处的OD值,OPG 浓度与OD450值之间呈正比,通过参考品绘制标准曲线,对照未知样本中OD值,即可算出标本中OPG 浓度。
人OPG参考标准曲线
注意:本图仅供参考,应以同次试验标准品所绘标准曲线计算标本含量。
灵敏度,特异性和重复性:
1.灵敏度:多次重复结果表明,最小检出量为15.2pg/ml。
2.特异性:与人CD40 ,sTNF RI, sTNF RII,TRANCE等没有交叉反应,与小鼠OPG有17%的交叉反应。
3.重复性:板内,板间变异系数均<10%.
只适用于科研,不能用于临床诊断。严禁用于临床医疗及其他非科研用途!以实际收货产品说明书为准,网站说明书仅供参考。
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