TRAIL简介：

TNF相关凋亡诱导配体（TRAIL），也称为TNFSF10和凋亡配体2（Apo2L），属于肿 瘤 坏 死 因 子超家族（TNFSF）。TRAIL是一种在细胞表面表达，分子量约32kDa，含281个氨基酸（aa）的II型跨膜蛋白，TRAIL通常被认为以分子量约66-80kDa的三聚体形式存在，而可溶性TRAIL作为表观分子重约24-28 kDa。虽然TRAIL是一种同源三聚体形成的卷状蛋白，但与其他TNFSF成员不同，它在三聚体界面内含有由三个内向Cys 230残基配位的锌离子，这种结构有利于TRAIL三聚体的稳定性，受体结合和功能是至关重要的。在TNFSF家族蛋白来说，TRAIL与Fas配体同源性 ，二者有28%同源性。人TRAIL与小鼠TRAIL有65%的同源性。

TRAIL在胎儿肾 脏，肝脏和肺等器官以及成人结 肠，心 脏，肾 脏，肺，卵巢，外周血 淋巴细胞，胎盘，前 列 腺，骨骼肌，小肠，脾脏和胸腺等器官中表达。TRAIL在不同肿 瘤细胞系中表达量差异较大，通过分别结合TRAIL受体1和2在多种淋巴系和非淋巴系来源的肿 瘤细胞系中诱导肿 瘤细胞凋亡。尽管TRAIL结合TRAIL R3（DcR1），TRAIL R4（DcR2）和骨保护素（OPG），但不能通过与这些受体结合而诱导细胞凋亡。TRAIL能够相比正常细胞而言，优先诱导肿 瘤细胞凋亡的特性，使其成为癌 症 的潜在 药物。

检测原理:

本试剂盒采用双抗体夹心ELISA法检测样本中TRAIL 的浓度。TRAIL 捕获抗体已预包被于酶标板上，当加入标本或参考品时，其中的TRAIL 会与捕获抗体结合，其它游离的成分通过洗涤的过程被除去。当加入生物素化的抗人TRAIL 抗体后，抗人TRAIL 抗体与TRAIL 接合，形成夹心的免疫复合物，其它游离的成分通过洗涤的过程被除去。随后加入辣根过氧化物酶标记的亲合素。生物素与亲合素特异性结合，亲合素连接的酶就会与夹心的免疫复合物连接起来；其它游离的成分通过洗涤的过程被除去。 加入显色剂，若样本中存在TRAIL 将会形成免疫复合物，辣根过氧化物酶会催化无色的显色剂氧化成蓝色物质，在加入终止液后呈黄色。通过酶标仪检测，读其450nm处的OD值，TRAIL 浓度与OD450值之间呈正比，通过参考品绘制标准曲线，对照未知样本中OD值，即可算出标本中TRAIL 浓度。

人TRAIL参考标准曲线

注意：本图仅供参考，应以同次试验标准品所绘标准曲线计算标本含量。

灵敏度，特异性和重复性:

1.灵敏度：多次重复结果表明，最小检出量为19.6pg/ml。

2.特异性：与人Fas Ligand,OPG,TNF-α,TRANCE/RANK L及小鼠TRAIL等没有交叉反应。

3.重复性：板内，板间变异系数均<10%.

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