C5a简介:
人的C5是一个190kDa的糖蛋白,能被裂解成两个部分,C5a和C5b。C5a是一个由C5蛋白α链裂解成的74个氨基酸的多肽。人的C5a与小鼠和大鼠的C5a分别有60%和54%的同源性。
与C3a类似,C5a也是一个过敏毒素,其过敏毒性超过C3a的活性100倍。C5a具有趋化活性。C5a与C5aR(CD88)结合,激活下游G蛋白耦连的通路,引起中性粒细胞趋化性和内皮细胞的活化。C5a也会引起巨噬细胞与中性粒细胞的急剧氧化,C5a能诱导嗜碱性粒细胞和肥大细胞释放组胺。
检测原理:
本试剂盒采用双抗体夹心ELISA法检测样本中C5a的浓度。C5a捕获抗体已预包被于酶标板上,当加入标本或参考品时,其中的C5a会与捕获抗体结合,其它游离的成分通过洗涤的过程被除去。当加入生物素化的抗人C5a抗体后,抗人C5a抗体与C5a接合,形成夹心的免疫复合物,其它游离的成分通过洗涤的过程被除去。随后加入辣根过氧化物酶标记的亲合素。生物素与亲合素特异性结合,亲合素连接的酶就会与夹心的免疫复合物连接起来;其它游离的成分通过洗涤的过程被除去。 加入显色剂,若样本中存在C5a将会形成免疫复合物,辣根过氧化物酶会催化无色的显色剂氧化成蓝色物质,在加入终止液后呈黄色。通过酶标仪检测,读其450nm处的OD值,C5a浓度与OD450值之间呈正比,通过参考品绘制标准曲线,对照未知样本中OD值,即可算出标本中C5a浓度。
人C5a参考标准曲线
注意:本图仅供参考,应以同次试验标准品所绘标准曲线计算标本含量。
灵敏度,特异性和重复性:
1.灵敏度:多次重复结果表明,最小检出量为17.5pg/ml。
2.特异性:与人C3a没有交叉反应,与C3有25%的交叉反应性。
3.重复性:板内,板间变异系数均<10%.
只适用于科研,不能用于临床诊断。严禁用于临床医疗及其他非科研用途!以实际收货产品说明书为准,网站说明书仅供参考。
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