IL-12P70简介:
IL-12P70也称为自然杀伤细胞刺激因子(NKSF)或细胞毒性淋巴细胞成熟因子(CLMF)主要是由受激发的巨噬细胞产生的多效性细胞因子。IL-12P70还可由树突状细胞、单核细胞、郎格罕细胞、嗜中性粒细胞和角化细胞等产生。
具生物学活性的人IL-12P70是二硫键连接一个40 kDa (p40)和35 kDa (p35)的亚基的异型复合体,即70 kDa (p70)。成熟的人40 kDa (p40)亚基有13个半胱氨酸和5个可糖基化的N末端的N313个氨基酸的蛋白。无论是p40 还是 p35亚基都不具有IL-12的生物学活性,但由两个p40亚基构成的同型复合物可与IL-12P70受体结合,从而充当IL-12P70的拮抗剂。虽然小鼠的IL-12P70对人和小鼠细胞都有活性,但人的IL-12P70只对人细胞有生物活性。
IL-12P70对T淋巴细胞和自然杀伤(NK)细胞有多种作用,这些作用包括在T细胞和NK细胞中诱导干扰素和肿 瘤 坏 死 因 子的生产,提高T细胞和NK细胞毒素的活性的以及刺激T细胞和NK细胞的分化。IL-12P70是IFN-γ的强烈诱导物,但诱导出的IFN-γ反过刺激吞噬细胞产生IL-12P70和其它促炎性因子,这样,由IL-12P70诱导的IFN-γ就在感染时促炎 症反应中反馈放大的机理中扮演重要的角色。IL-12P70 在通过提高Th1细胞介导的免疫反应中有重要作用。
检测原理:
本试剂盒采用双抗体夹心ELISA法检测样本中IL-12P70的浓度。
IL-12P70捕获抗体已预包被于酶标板上,当加入标本或参考品时,其中的IL-12P70 会与捕获抗体结合,其它游离的成分通过洗涤的过程被除去。当加入生物素化的抗人IL-12P70 抗体后,抗人IL-12P70 抗体与IL-12P70 接合,形成夹心的免疫复合物,其它游离的成分通过洗涤的过程被除去。随后加入辣根过氧化物酶标记的亲合素。生物素与亲合素特异性结合,亲合素连接的酶就会与夹心的免疫复合物连接起来;其它游离的成分通过洗涤的过程被除去。 加入显色剂,若样本中存在IL-12P70 将会形成免疫复合物,辣根过氧化物酶会催化无色的显色剂氧化成蓝色物质,在加入终止液后呈黄色。通过酶标仪检测,读其450nm处的OD值,IL-12P70 浓度与OD450值之间呈正比,通过参考品绘制标准曲线,对照未知样本中OD值,即可算出标本中IL-12P70 浓度。
人IL-12P70参考标准曲线
注意:本图仅供参考,应以同次试验标准品所绘标准曲线计算标本含量。
灵敏度,特异性和重复性:
1.灵敏度:多次重复结果表明,最小检出量为5.8pg/ml。
2.特异性:与人的G-CSF、IL-6、IL-12/IL-23 p40及小鼠IL-12 p70、IL-12/IL-23 p40无交叉反应性。
3.重复性:板内,板间变异系数均<10%.
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