IL-8简介:
IL-8是由巨噬细胞产生的单核因子,是趋化因子家族C-X-C亚族(α亚族)中的一员,对中性粒细胞、T淋巴细胞、嗜碱性粒细胞具有趋化作用,能够吸附中性粒细胞,嗜碱性粒细胞和T细胞,但是单核细胞除外。人的IL-8 cDNA 序列表明有99个氨基酸残基。经过剪节掉22个个残基后,形成成熟的具有77个氨基酸的蛋白。IL-8还能够调节T淋巴细胞、B淋巴细胞成熟分化,在炎 症反应、免 疫 调 节中起重要作用,并且研究表明IL-8还具有促进血 管生成的作用。IL-8在人体内存在两种主要形式,一种是来源于单核细胞含72个氨基酸的多肽,另一种是来源于内皮细胞含77个氨基酸的多肽。72aa比77aa的IL-8具有更高的趋化活性,而77aa的IL-8具有诱导白 血 病细胞凋亡的功能,其位于N端的五肽序列已被确定是IL-8具有诱导凋亡功能的活性部位。
检测原理:
本试剂盒采用双抗体夹心ELISA法检测样本中IL-8 的浓度。
IL-8 捕获抗体已预包被于酶标板上,当加入标本或参考品时,其中的IL-8 会与捕获抗体结合,其它游离的成分通过洗涤的过程被除去。当加入生物素化的抗人IL-8 抗体后,抗人IL-8 抗体与IL-8 接合,形成夹心的免疫复合物,其它游离的成分通过洗涤的过程被除去。随后加入辣根过氧化物酶标记的亲合素。生物素与亲合素特异性结合,亲合素连接的酶就会与夹心的免疫复合物连接起来;其它游离的成分通过洗涤的过程被除去。 加入显色剂,若样本中存在IL-8 将会形成免疫复合物,辣根过氧化物酶会催化无色的显色剂氧化成蓝色物质,在加入终止液后呈黄色。通过酶标仪检测,读其450nm处的OD值,IL-8 浓度与OD450值之间呈正比,通过参考品绘制标准曲线,对照未知样本中OD值,即可算出标本中IL-8 浓度。
人IL-8参考标准曲线
注意:本图仅供参考,应以同次试验标准品所绘标准曲线计算标本含量。
灵敏度,特异性和重复性:
1.灵敏度:多次重复结果表明,最小检出量为5.58pg/ml。
2.特异性:与人GRO、IP-10、MIP-1、MCP-1、MCP-2、MCP-3、I-309,小鼠 KC等没有交叉反应。
3.重复性:板内,板间变异系数均<10%.
临床诊断。严禁用于临床医疗及其他非科研用途!以实际收货产品说明书为准,网站说明书仅供参考。
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