G-CSF简介:
粒细胞集落刺激因子(G-CSF)是一个由噬中性粒细胞和单核细胞受刺激或抵抗细 菌 感 染后产生的天然细胞因子,主要由单核细胞和巨噬细胞在内毒素、TNF-α和 IFN-γ等的刺激后产生。在受脂蛋白、IL-1 或 TNF-α等刺激后,一些如成纤维细胞、内皮细胞、星形胶质细胞、骨基质细胞等类型的细胞都可分泌G-CSF,此个,各类肿 瘤细胞系和髓系白 血 病细胞也能分泌G-CSF。
小鼠G-CSF cDNA编码含30个信号肽的一段208氨基酸的前体蛋白,经裂解后,成熟的G-CSF含O位糖基化位点,两个内部二硫键的178个氨基酸蛋白。小鼠和人的G-CSF在氨基酸水平上有76%的同源性。
在人类来说,G-CSF蛋白可由两个活性明显有差异的异构体,分别来源于207个氨基酸的前体蛋白和204个氨基酸的前体蛋白。两者均有30个氨基酸的信号肽,除了在N末端第35位有3个插入的氨基酸的区别外,两个蛋白有相同的蛋白序列。据报道前体是204个氨基酸的成熟蛋白的活性比前体为207的成熟蛋白活性强十倍。
G-CSF已证明有好几方面的 应用,包括 新生儿感染、急 性 心 肌 梗 塞、粒细胞减少症中粒细胞静 脉注射、严重的感染和脓毒症、自身免疫性的粒细胞减少症,急性髓系白 血 病的 、艾滋的 及斯维茨综合症的 等。
检测原理:
本试剂盒采用双抗体夹心ELISA法检测样本中小鼠G-CSF的浓度。小鼠G-CSF捕获抗体已预包被于酶标板上,当加入标本或参考品时,其中的小鼠G-CSF会与捕获抗体结合,其它游离的成分通过洗涤的过程被除去。当加入生物素化的抗小鼠G-CSF抗体后,抗小鼠G-CSF抗体与小鼠G-CSF接合,形成夹心的免疫复合物,其它游离的成分通过洗涤的过程被除去。随后加入辣根过氧化物酶标记的亲合素。生物素与亲合素特异性结合,亲合素连接的酶就会与夹心的免疫复合物连接起来;其它游离的成分通过洗涤的过程被除去。 加入显色剂,若样本中存在G-CSF将会形成免疫复合物,辣根过氧化物酶会催化无色的显色剂氧化成蓝色物质,在加入终止液后呈黄色。通过酶标仪检测,读其450nm处的OD值,小鼠G-CSF浓度与OD450值之间呈正比,通过参考品绘制标准曲线,对照未知样本中OD值,即可算出标本中G-CSF浓度。
小鼠G-CSF参考标准曲线
注意:本图仅供参考,应以同次试验标准品所绘标准曲线计算标本含量。
灵敏度,特异性和重复性:
1.灵敏度:多次重复结果表明,最小检出量为27.4pg/ml。
2.特异性:与人G-CSF,CNTF及小鼠的CT-1,IL-6,LIF,IL-11,Leptin等没有交叉反应。
3.重复性:板内,板间变异系数均<10%.
临床诊断。严禁用于临床医疗及其他非科研用途!以实际收货产品说明书为准,网站说明书仅供参考。
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