L-SELECTIN 简介:
LSelectin(也称为白细胞选择素、淋巴结归巢受体和CD62L)是选择素家族的成员,是一种在多种白细胞上组成性表达的细胞表面糖蛋白。不同的白细胞表面表达的L-选择素分子量不同,但目前只分离出一种形式的mRNA,显然是翻译后修饰的结果。淋巴细胞的表达的L-选择素分子量为74kda,而中性粒细胞的表达的L-选择素分子量为95~105kda。人和小鼠LSelectin有76%的氨基酸序列同源性。
LSelectin在淋巴细胞迁移到外周淋巴结和慢性炎 症部位以及中性粒细胞迁移到急性炎 症部位中发挥作用。LSelectin与PSelectin和ESelectin协同作用,介导循环白细胞与内皮细胞的初始相互作用,从而在内皮细胞上产生白细胞的特征性“滚动”。这种最初的相互作用涉及ICAM1 和VCAM1等,最终导致白细胞通过血 管壁外渗到细胞外基质组织。
游离型的L选择素是一种黏附缓冲系统, 血清sL选择素的变化可以反映炎 症的消长,可用 于 监 测一 些 炎 性 或 免 疫 性 疾 病发生和发展。
检测原理:
本试剂盒采用双抗体夹心ELISA法检测样本中L-SELECTIN的浓度。L-SELECTIN捕获抗体已预包被于酶标板上,当加入标本或参考品时,其中的L-SELECTIN会与捕获抗体结合,其它游离的成分通过洗涤的过程被除去。当加入生物素化的抗小鼠L-SELECTIN抗体后,抗小鼠L-SELECTIN抗体与L-SELECTIN接合,形成夹心的免疫复合物,其它游离的成分通过洗涤的过程被除去。随后加入辣根过氧化物酶标记的亲合素。生物素与亲合素特异性结合,亲合素连接的酶就会与夹心的免疫复合物连接起来;其它游离的成分通过洗涤的过程被除去。 加入显色剂,若样本中存在L-SELECTIN将会形成免疫复合物,辣根过氧化物酶会催化无色的显色剂氧化成蓝色物质,在加入终止液后呈黄色。通过酶标仪检测,读其450nm处的OD值,L-SELECTIN浓度与OD450值之间呈正比,通过参考品绘制标准曲线,对照未知样本中OD值,即可算出标本中L-SELECTIN浓度。
小鼠L-SELECTIN 参考标准曲线
注意:本图仅供参考,应以同次试验标准品所绘标准曲线计算标本含量。
灵敏度,特异性和重复性:
1.灵敏度:多次重复结果表明,最小检出量为116pg/ml。
2.特异性:与小鼠的E-selectin,ICAM-1,VCAM-1,p-selectin等均没有交叉反应,与人L-selectin没有交叉反应性。
3.重复性:板内,板间变异系数均<10%.
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