M-CSF简介:
M-CSF,也称为CSF-1,是一种四α-螺旋束的细胞因子。尽管M-CSF具有各种大小的不同亚型,但所有亚型均包含N端的150个氨基酸(aa)部分。人M-CSF的前体是可以形成分子量为140kDa的共价二聚体,含522个氨基酸的 I型跨膜(TM)蛋白。通过不同的加工,它可以形成两个蛋白水解后的分泌型的二聚体。 种是N-和O-均糖基化的86kDa二聚体, 种是既有糖基化又和硫酸软骨素蛋白多糖(PG)修饰的分子量200kDa的二聚体。小鼠成熟M-CSF所有亚型共有的区域分别与大鼠,犬,牛和人M-CSF的相应区域分别有87%,83%,82%和81%的氨基酸序列同源性。虽然人类M-CSF在小鼠体内有生物活性,但小鼠M-CSF具有物种特异性。
M-CSF主要在成纤维细胞,活化的巨噬细胞,子宫内膜分泌上皮细胞,骨髓基质细胞,维生素D刺激的成骨细胞和活化的内皮细胞中表达。作为巨噬细胞存活,增殖和分化的主要调节剂,M-CSF调节巨噬细胞中细胞因子和其他炎性调节剂的释放,并增强趋化性和胞饮作用。此外,M-CSF还通过引发和增强巨噬细胞对肿 瘤细胞和微生物的杀伤而具有一定的 作用。
检测原理:
本试剂盒采用双抗体夹心ELISA法检测样本中小鼠M-CSF的浓度。小鼠M-CSF捕获抗体已预包被于酶标板上,当加入标本或参考品时,其中的小鼠M-CSF会与捕获抗体结合,其它游离的成分通过洗涤的过程被除去。当加入生物素化的抗小鼠M-CSF抗体后,抗小鼠M-CSF抗体与小鼠M-CSF接合,形成夹心的免疫复合物,其它游离的成分通过洗涤的过程被除去。随后加入辣根过氧化物酶标记的亲合素。生物素与亲合素特异性结合,亲合素连接的酶就会与夹心的免疫复合物连接起来;其它游离的成分通过洗涤的过程被除去。 加入显色剂,若样本中存在M-CSF将会形成免疫复合物,辣根过氧化物酶会催化无色的显色剂氧化成蓝色物质,在加入终止液后呈黄色。通过酶标仪检测,读其450nm处的OD值,小鼠M-CSF浓度与OD450值之间呈正比,通过参考品绘制标准曲线,对照未知样本中OD值,即可算出标本中M-CSF浓度。
小鼠M-CSF参考标准曲线
注意:本图仅供参考,应以同次试验标准品所绘标准曲线计算标本含量。
灵敏度,特异性和重复性:
1.灵敏度:多次重复结果表明,最小检出量为15.2pg/ml。
2.特异性:与小鼠Flt-3 Ligand, SCF,G-CSF,GM-CSF及人M-CSF等没有交叉反应。
3.重复性:板内,板间变异系数均<10%.
临床诊断。严禁用于临床医疗及其他非科研用途!以实际收货产品说明书为准,网站说明书仅供参考。
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