TIMP-1简介:
金属蛋白酶组织抑制因子(TIMPs)是MMPs家族的组织抑制剂,广泛分布于组织和体液中,共价结合MMPs而抑制其活性。TIMPs 家族有四个蛋白,TIMP1、 TIMP2、 TIMP3 和TIMP4, TIMP-1是一种可由许多不同种类细胞产生的分子量为28KD的糖蛋白,是一种重要的MMPs的抑制剂,与MMPs的酶原或活化后酶的催化区的羧基末端特异性结合,形成复合物,从而特异性抑制MMPs的水解活性。除了抑制MMPs外,TIMP-1在组织动态平衡中也起重要的作用
检测原理:
本试剂盒采用双抗体夹心ELISA法检测样本中TIMP-1的浓度。TIMP-1捕获抗体已预包被于酶标板上,当加入标本或参考品时,其中的TIMP-1会与捕获抗体结合,其它游离的成分通过洗涤的过程被除去。当加入生物素化的抗小鼠TIMP-1抗体后,抗小鼠TIMP-1抗体与TIMP-1接合,形成夹心的免疫复合物,其它游离的成分通过洗涤的过程被除去。随后加入辣根过氧化物酶标记的亲合素。生物素与亲合素特异性结合,亲合素连接的酶就会与夹心的免疫复合物连接起来;其它游离的成分通过洗涤的过程被除去。 加入显色剂,若样本中存在TIMP1将会形成免疫复合物,辣根过氧化物酶会催化无色的显色剂氧化成蓝色物质,在加入终止液后呈黄色。通过酶标仪检测,读其450nm处的OD值,TIMP-1浓度与OD450值之间呈正比,通过参考品绘制标准曲线,对照未知样本中OD值,即可算出标本中TIMP-1浓度。
小鼠TIMP-1参考标准曲线
注意:本图仅供参考,应以同次试验标准品所绘标准曲线计算标本含量。
灵敏度,特异性和重复性:
1.灵敏度:多次重复结果表明,最小检出量为22pg/ml。
2.特异性:与人TIMP-1,TIMP-2,TIMP-3,TIMP-4和大鼠TIMP-1等没有交叉反应。
3.重复性:板内,板间变异系数均<10%.
临床诊断。严禁用于临床医疗及其他非科研用途!以实际收货产品说明书为准,网站说明书仅供参考。
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