PD-1简介：

程序性死亡分子1(PD-1)，最早从小鼠T细胞杂交瘤细胞2B4.11内克隆得到。是一个属于CD28/CTLA-4超家族的成员。PD-1是I型跨膜蛋白，主要作用是作为免 疫 抑 制分子。CD28/CTLA-4超家族成员包括CD28 , CTLA-4 和 ICOS。小鼠的PD-1蛋白，由PD-1基因编码，包括四个部分，20个氨基酸的信号肽，149个氨基酸的胞外部分，21个氨基酸的跨膜部分，98个氨基酸的胞内部分。小鼠的PD-1与人的蛋白在结构上有69%的同源性。

PD-1与其配体PD-L1 (B7H1) 和 PD-L2 (B7DC)以1：1理想配比出现而相互结合。PD-1一般在活化的T细胞，B细胞，单核细胞及树突状细胞表面表达，而其配体PD-L1在同类细胞或非造血细胞如肺内皮细胞和肝实质细胞等。PD-1和PD-L1的结合会对T细胞产生联合抑制的信号，引起T细胞的凋亡，免疫耐受和功能衰竭等。因此，PD-1在免疫 ，肿 瘤 ，感染 ，自身免 疫 病 及组织移植等方面，是一个非常有用的靶点。

检测原理:

本试剂盒采用双抗体夹心ELISA法检测样本中PD-1的浓度。PD-1捕获抗体已预包被于酶标板上，当加入标本或参考品时，其中的PD-1会与捕获抗体结合，其它游离的成分通过洗涤的过程被除去。当加入生物素化的抗小鼠PD-1抗体后，抗小鼠PD-1抗体与PD-1接合，形成夹心的免疫复合物，其它游离的成分通过洗涤的过程被除去。随后加入辣根过氧化物酶标记的亲合素。生物素与亲合素特异性结合，亲合素连接的酶就会与夹心的免疫复合物连接起来；其它游离的成分通过洗涤的过程被除去。 加入显色剂，若样本中存在PD-1将会形成免疫复合物，辣根过氧化物酶会催化无色的显色剂氧化成蓝色物质，在加入终止液后呈黄色。通过酶标仪检测，读其450nm处的OD值，PD-1浓度与OD450值之间呈正比，通过参考品绘制标准曲线，对照未知样本中OD值，即可算出标本中PD-1浓度。

小鼠PD-1参考标准曲线

灵敏度，特异性和重复性:

1.灵敏度：多次重复结果表明，最小检出量为55pg/ml。

2.特异性：与小鼠的B7-H1,PD-L2及人的PD-1/Fc Chimera等没有交叉反应。。

3.重复性：板内，板间变异系数均<10%.

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