GDF-8简介:
生长分化因子8(GDF-8),也称为肌生长抑制素,是一种分泌型TGF-β超家族蛋白之一。GDF-8分泌的前体是376氨基酸(aa)的前蛋白,由24个aa信号肽、243个aa前肽和109个aa成熟蛋白组成。分泌的前蛋白被BMP-1家族蛋白酶分解,形成12kDa生物活性成熟蛋白和35-40kDa前肽。在前肽中,小鼠GDF-8与人和大鼠GDF-8的氨基酸序列同源性分别为96%和99%。在人、小鼠和大鼠中成熟GDF-8蛋白的氨基酸序列是 保守的。
肌生长抑 制 素 在 生 长发育的骨骼肌和成年骨骼肌中表达。肌生长抑制素是骨骼肌质量的有效负性调节因子,心 肌 梗 死后,肌生长抑制素可以控制心 肌 梗 死区周围心肌细胞的成肌细胞增殖和上调。肌 肉 生 长抑制素由机械刺激引起的应激的心肌细胞释放,并诱导心 力 衰 竭常见的骨骼肌萎缩。GDF-8遗传物质缺失或敲除可导致能量平衡和代谢的多重变化,包括增加脂肪酸氧化和棕色脂肪形成,减少白色脂肪积累和循环胆固醇和甘油三酯水平,增加外周胰岛素敏感性和对饮食诱导肥 胖的抵 抗 力。
检测原理:
本试剂盒采用双抗体夹心ELISA法检测样本中GDF-8的浓度。GDF-8捕获抗体已预包被于酶标板上,当加入标本或参考品时,其中的GDF-8会与捕获抗体结合,其它游离的成分通过洗涤的过程被除去。当加入生物素化的抗GDF-8抗体后,抗GDF-8抗体与GDF-8接合,形成夹心的免疫复合物,其它游离的成分通过洗涤的过程被除去。随后加入辣根过氧化物酶标记的亲合素。生物素与亲合素特异性结合,亲合素连接的酶就会与夹心的免疫复合物连接起来;其它游离的成分通过洗涤的过程被除去。 加入显色剂,若样本中存在GDF-8将会形成免疫复合物,辣根过氧化物酶会催化无色的显色剂氧化成蓝色物质,在加入终止液后呈黄色。通过酶标仪检测,读其450nm处的OD值,GDF-8浓度与OD450值之间呈正比,通过参考品绘制标准曲线,对照未知样本中OD值,即可算出标本中GDF-8浓度。
GDF-8参考标准曲线
注意:本图仅供参考,应以同次试验标准品所绘标准曲线计算标本含量。
1.灵敏度:多次重复结果表明,最小检出量为29.4pg/ml。
2.特异性:与人Activin RIIB/Fc Chimera,GASP-2,GDF-11等没有交叉反应。 3.重复性:板内,板间变异系数均<10%.
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