猪IFN-γ简介:
被称为II型干扰素的IFN-γ,是由143个残基构成的,有20和25kDa亚型的糖蛋白,以头尾相连的同型糖蛋白的形式存在。成熟的猪IFN-γ存在非共价结合的同型二聚体,由于糖链不同,分子量分别在20~25 kDa。成熟的猪IFN-γ与牛,犬,马,猫等分别有72%~79%的同源性,与棉鼠,人,小鼠,大鼠及恒河猴等有41%~57%的同源性。
IFN-γ由T淋巴细胞和NK细胞产生,用以 和干扰增殖,此外,IFN-γ还有与免疫调 节 相 关 的 几 种 功 能包括调节细胞的增殖和程序性死亡,刺激或抑制不同基因的表达。IFN-γ能通过诱导产生吲哚胺2,3-双加氧酶来抗弓形虫和衣原体的感染。IFN-γ是效应强烈的单核吞噬细胞增强剂,IFN-γ是通过增强单核吞噬细胞的Mac-1的表达来达到增强胞饮作用和吞噬作用的。IFN-γ通过增加巨噬细胞的氧自由基和TNF-α的释放来达到增强杀肿 瘤细胞的作用。IFN-γ选择性地提高包括因LPS刺激的B细胞的IgG2a和因2型T细胞呈递抗原而引起的B细胞的IgG3的释放量。有报道称IFN-γ能引起细胞的自分泌IFN-γ作用的增强。
检测原理:
本试剂盒采用双抗体夹心ELISA法检测样本中IFN-γ的浓度。IFN-γ捕获抗体已预包被于酶标板上,当加入标本或参考品时,其中的IFN-γ会与捕获抗体结合,其它游离的成分通过洗涤的过程被除去。当加入生物素化的抗猪IFN-γ抗体后,抗猪IFN-γ抗体与IFN-γ接合,形成夹心的免疫复合物,其它游离的成分通过洗涤的过程被除去。随后加入辣根过氧化物酶标记的亲合素。生物素与亲合素特异性结合,亲合素连接的酶就会与夹心的免疫复合物连接起来;其它游离的成分通过洗涤的过程被除去。 加入显色剂,若样本中存在IFN-γ将会形成免疫复合物,辣根过氧化物酶会催化无色的显色剂氧化成蓝色物质,在加入终止液后呈黄色。通过酶标仪检测,读其450nm处的OD值,IFN-γ浓度与OD450值之间呈正比,通过参考品绘制标准曲线,对照未知样本中OD值,即可算出标本中IFN-γ浓度。
猪IFN-γ参考标准曲线
注意:本图仅供参考,应以同次试验标准品所绘标准曲线计算标本含量。
灵敏度,特异性和重复性:
1.灵敏度:多次重复结果表明,最小检出量为51pg/ml。
2.特异性:与猪IL-6,TNF-α以及小鼠IFN-γ,大鼠IFN-γ,人IFN-γ,狗IFN-γ,猫IFN-γ等没有交叉反应。
3.重复性:板内,板间变异系数均<10%.
临床诊断。严禁用于临床医疗及其他非科研用途!以实际收货产品说明书为准,网站说明书仅供参考。
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