英文名:DO Supplement -His/-Leu/-Met/-Trp/-Ura
储存条件:常温密封,长期不用建议 2-8 ℃储存
运输温度:常温运输
酵母培养基的配制:
(1)Rich Liquid Media (Broth)
1. 取 50 克YPD(PM2010) 或者YPDA(PM2011 添加了硫酸腺嘌呤)加 1 L去离子水,搅拌溶解。
2. pH 值调至 6.5(可省步骤)。121 ℃高压灭菌 15 分钟。
3. 避光、室温条件下储存灭菌培养基。
(2)Rich Plating Media with Agar
1. 取 70 克YPD Agar(PM2020) 或者YPDA Agar(PM2021 添加了硫酸腺嘌呤)加 1 升去离子水,搅拌溶解(琼脂在高压灭菌过程中溶解)。
2. pH 值调至 6.5(可省步骤)。121 ℃高压灭菌 15 分钟。
3. 冷却到 50 ℃把培养基倒入平板中,室温使其凝固。封口膜封好后倒置保存在4 ℃冰箱。
(3)SD Media
1. 根据下表,在1 L 去离子水中加入相应量的Minimal SD Base(PM2030)和DO Supplement,搅拌溶解。或选择复配好的产品(独立包装,即拆即用)。
2. 无需调整 pH 值。121 ℃高压灭菌 15 分钟。
3. 4 ℃冰箱避光储存已经灭菌的液体培养基。
(4)SC Media
1. 根据下表在900 mL去离子水中加入相应量的 YNB(PM2070)和DO Supplement(缺陷型氨基酸混合物),搅拌溶解。或选择复配好的产品。
2. 调pH至5.8(复配好的产品无需调整)。121 ℃高压灭菌15分钟。
3. 4 ℃冰箱避光储存已经灭菌的液体培养基。
4. 使用前加入100 mL已过滤除菌的20%葡萄糖溶液(或其它碳源),混匀。
5. 如需配制平板,应在 步加入琼脂,20g/L。
注:SC Media 是不含葡萄糖的SD Media。葡萄糖高温灭菌会有碳化现象,控制好灭菌温度和时间,葡萄糖的微量碳化对实验影响并不大。没有特别要求一般建议用SD Media。
(5) SD Agar Media
1. 根据下表,在 500 mL 去离子水中加入相应量 Minimal SD Agar Bas(e PM2040)和DO Supplement(缺陷型氨基酸混合物)搅拌溶解(琼脂在高温灭菌过程中溶解)。或选择复配好的产品(独立包装,即拆即用)。
2. 无需调整 pH 值。121 ℃高压灭菌 15 分钟。
3. 冷却到 50 ℃把培养基倒入平板中,室温使其凝固。封口膜封好后倒置保存在 4 ℃冰箱。
注意事项:
1. 全系复配好的 SD/SC Media 无需调整 pH 值,DO Supplement 与 YNB或其它品牌产品搭配做固体培养基使用时,需调整 pH 值至 5.8。
2. GAL1 启动子诱导表达要选用 Minimal SD Agar Base Gal/Raf 培养基。
3. 在配制酵母缺陷培养基时,建议配成SD Media 或 SD Agar Media,虽然葡萄糖在灭菌时会有碳化变色现象,培养基变为浅黄到深褐色不等,但对酿酒酵母的生长不会产生严重影响。
4. 若实验要求不能出现糖的碳化现象,或者需要添加其它碳源,也可选择 SCMedia,在灭菌后加入过滤除菌的葡萄糖( SL6450)或其它碳源。
5. Minimal SD Agar Base Gal/Raf 培养基高温高压下可能对诱导效果产生抑止,尤其是在做表达调节 介导的功 能互补实验需特别注意!
临床诊断。严禁用于临床医疗及其他非科研用途!以实际收货产品说明书为准,网站说明书仅供参考。
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