英文名:Yeast Total Protein Extraction Kit
储存条件: RT,未开封有效期24个月。
产品内容:
产品说明:
本产品通过使用玻璃珠震荡法破壁结合化学法破碎酵母细胞壁,适用于多种酵母菌的培养物(包括菌液或平板菌落)。提取液不含蛋白变性剂,提取过程无需高温处理,提取的总蛋白可用于蛋白活性检测相关实验。该试剂盒提取的蛋白可以用Bradford定量试剂盒(SK1060) 或BCA定量试剂盒(SK1070)进行蛋白定量。
准备步骤:
将洗涤液和提取液置于冰上预冷。
操作步骤(小提):
1. 5,000 mp,4 °C离心5 min, 收集酵母菌液(1-5mL)细胞沉淀(酵母菌液OD值0.5-2.0)。
2.加入1 mL预冷的洗涤液,震荡混匀。5,000 rmp, 4 °C离心5 min沉淀酵母细胞,弃上清。
3.用100 μuL预冷提取液悬浮酵母细胞,并快速转移到1.5 mL塑料离心管中。
4.加入0.05 g的玻璃珠,在旋涡震荡器上剧烈震荡混合5-10 min (间歇冰浴冷却)。
5.用移液器或者巴斯德吸管回收提取液。
6. 再加入100 μL预冷提取液到剩余的玻璃珠中,稍加震荡,再次回收提取液。
7.合并两次所得提取液即为酵母总蛋白样品。