热启动RAPA3G DNA聚合酶
描述:
Hotstart RAPA3G DNA Polymerase 为第三代 DNA聚合酶,具有 5’-3’外切酶活性,不具有 3’-5’外切酶活性,其具有 的杂质耐受性(对乙醇、胍盐、肝素具有极高的耐受性),因此对于纯度较差的 DNA 模板,该酶仍然可以获得理想的实验结果。RAPA3G DNA 聚合酶为化学法修饰的HotStart 版本,其在 50℃以下 无活性,只有 95℃条件下加热 5min 后才能完全恢复酶的活力。因此该系统可以有效抑制非特异性 PCR 扩增,极大的提高了 PCR 扩增特异性和灵敏度。该酶配有独特的反应缓冲液,可在宽范围中得到良好的扩增结果、检测灵敏度更高、信号更强。
注意
1. 5×HotStart RAPA3G Buffer 中未添加 Mg 2+,配制反应时应加入适当浓度的 Mg 2+,推荐反应终浓度为 2.5mM。
2. HotStart RAPA3G DNA Polymerase (10U/μl)中含有40%浓度甘油,使用时应小心吸取。
活性定义
一个活力单位即在在 74℃条件下,30 分钟内催化 10 nmoldNTP 的掺入反应成为酸不溶性物质所需的酶量。
储存
请避光置于-20℃以下可保存 3 年,该试剂经 30 次冻融后性能无下降,因此不使用时请置于-20℃避光保存。
注意:(1)在 50 μl 的 PCR 反应体系中 HotStart RAPA3GDNA Polymerase 的用量可在 0.1-0.5μl 进行调整。(2)Mg 2+的浓度通常在 2-4 mM 时可获得理想的扩增结果。
2. qPCR 扩增程序用两步法:
注意:由于该酶为化学修饰的热启动 RAPA3G DNA 聚合酶,必须于 95℃加热 5min 才能恢复酶的活性,该热启动步骤不能缩短时间。
3. 常规 PCR 三步法程序:
注意:由于该酶为化学修饰的热启动 RAPA3G DNA 聚合酶,必须于 95℃加热 5min 才能恢复酶的活性,该热启动步骤不能缩短时间。
临床诊断。严禁用于临床医疗及其他非科研用途!以实际收货产品说明书为准,网站说明书仅供参考。