RAPA HiFi DNA聚合酶
描述:
RAPA HiFi DNA 聚合酶,其来源于高保真 DNA 聚合酶,并加入了增强的延伸结构,使其具有超保真性能(~280倍 Taq)、长片段扩增能力、高产量。长片段扩增能力,使用该酶可轻松扩增 8kb 的基因组 DNA、20kb 的λDNA、8kb的 cDNA。该酶具有 6kb/min 以上的延伸速度。该酶具有 5’-3’的聚合酶活性、强 3’-5’的外切酶活性,产物为平末端。
组分
注意:2xRAPA HiFi Buffer 中含有 4mM Mg2+,无需再单独添加。
主要特征
(1) 超保真扩增:~280 倍 Taq 的保真性能,是载体构建、点突变、NGS 模板扩增、基因合成的 用酶。
(2) 快速扩增:具有 6kb/min 的扩增能力。
(3) 长片段扩增:质粒、λDNA 等简单模板可以有效扩增>20 kb,基因组可以有效扩增>8 kb,cDNA 可以有效扩增>8kb。
储存:长期储存置于-20°C 以下,可保存 2 年;短期使用置于 4°C(3 个月)保存。
使用方法
1. 按下表配制反应体系并混合均匀:
2. PCR 扩增循环参数
(1)扩增片段<5kb 时采用如下程序
3. 电泳:1% 琼脂糖凝胶电泳,上样 5 μl,电泳结束在紫外灯下检测条带。
4. 注意事项:
(1)当模板 GC 含量>65%时,请添加 5× Q-Solution
(2)当扩增片段<1kb 时,延伸时间可直接使用 15s,当扩增片段>5 kb 时,按照 2-3 kb/min 的延伸时间进行设置,能获得更高的产量。
(3)由于不同的 PCR 管其导热性能有所不同,通常 PCR采用 25 μl 体系可以获得更高的产量。
临床诊断。严禁用于临床医疗及其他非科研用途!以实际收货产品说明书为准,网站说明书仅供参考。