Hi T7 高产RNA 合成试剂盒
描述:
Hi T7 高产 RNA 合成试剂盒可在体外高效合成多种类型的 RNA 如 mRNA、lncRNA、shRNA 等。利用 Hi T7 RNA 聚合酶识别 T7 promoterTTCTAATACGACTCACTATAGG)以方框中 G 碱基为起点开始转录,该试剂盒可以从少量样本得到高效转录,单次反应可获得高达 150-200 μg 的产物,转录长度可达 4000nt 以上。
利用该试剂盒得到的 RNA 适用于多种下游应用,如RNA 结构和功能研究、核酸酶生物化学研究、RNase 保护
分析探针、印迹杂交、反义 RNA 及 RNAi 实验、微阵列分析、显微注射、体外翻译和 RNA 疫苗等。
Hi T7 高产 RNA 合成试剂盒使用方便,使用优化好的预混液,有利于用户快速建立反应。本试剂盒还配备了 DNase I,在 RNA 合成完毕后可快速去除 DNA 模板,便于获得高纯度转录 RNA。
原理:
组分:
(1) 2×Hi T7 Trans Solution 中包含反应 Buffer、rNTP。
(2) T7 Trans Enzyme Mix 中包含 Hi T7 RNA 聚合酶、Rnase Inhibitor 等。
保存:
-20℃可保存 2 年,避免反复冻融。
操作步骤:
(1) 按以下组分配制反应液
(2)37℃反应 4h,转录 RNA 产量在 120~200 μg。
(3) 转录完毕后,向反应液中加入 2.5 μl 的 10xRD Buffer和 2 μl 的 RNase Free DNase I,37℃孵育 15min,以去除DNA 模板。
(4)整个反应完毕后可取 0.05~0.1 μl 转录产物进行电泳检测,并冻存于-80℃保存。选用 LiCl 沉淀纯化或 5min RNAPurification Kit 进行转录 RNA 的纯化,以去除盐、rNTP、蛋白等。
临床诊断。严禁用于临床医疗及其他非科研用途!以实际收货产品说明书为准,网站说明书仅供参考。
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