TdT末端转移酶(Terminal Transferase)
描述:
末端转移酶(TdT)是一种不依赖于模板的 DNA 聚合酶,催化脱氧核苷酸结合到 DNA 分子的 3’羟基端。带有
突出、凹陷或平滑末端的单双链 DNA 分子均可作为 TdT 的底物,加尾长度可达 5~300nt。本酶经电子重构架技术筛选,使其可以在 45°C 高温下反应,从而避免因 DNA 二级结构造成的加尾效率下降。
该酶广泛用于 DNA 的 3’末端添加同聚物、利用修饰碱基(如 ddNTP,DIGd
组分
活性定义:37 ℃ 60 分钟内,催化 1nmol dNTP 加入到多聚核苷酸 3’羟基末端中所需的酶量定义为 1 个活性单位
热失活:75°C 20min。
储存:-20℃ 可保存 3 年。
反应实例
1.配制反应体系
45°C 孵育 30min,本酶反应温度可在 37~45°C 之间调整,45°C 条件下更利于末端暴露,从而利于加尾。
2. 75°C 20min 失活。
注意事项
1、适量 EDTA 可使 Terminal Transferase 的活性丧失。
2、金属离子螯合剂,较高浓度的铵根离子、氯离子、碘例子和磷酸根离子均对 Terminal Transferase 活性具有抑制作用。
3、DNA 末端 mol 数的计算,长度为 100bp 的 DNA:1pmol末端 DNA=0.33ng。
临床诊断。严禁用于临床医疗及其他非科研用途!以实际收货产品说明书为准,网站说明书仅供参考。
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