TGIRT-III Reverse Transcriptase
描述:
TGIRT-III RTnase 具有依赖于 DNA/RNA 杂交链的反转录酶活性,能快速合成 cDNA,该酶具有强的链转换活性(Switch)。因此该酶可用于 tRNA、ncRNA、miRNA 等核酸分子的同步逆转录和加接头(TGIRT template-switching reaction,用于 TGIRT-Seq)。TGIRT-III RTnase 具有极强的延伸性能,因此更易获得全长的 cDNA。除此外,该酶具有的强 switch 活性,使得可以利用 RNA 的 5’端帽结构进行SMART 建库(SAMRT-Seq)。该酶的反应温度为 37-60°C, 反应温度为 50°C。
室温孵育 30min 后,加入 2.5 μl 的 10mM dNTP 后,于37-60°C(推荐温度为 50°C)条件下反应 5-60min(通常15min)。
失活:反应结束后,向反应体系中加入 1μl 的 5N NaOH,并置于 95°C 下加热 3min,失活该酶。失活后加入 5N HCl中和高碱性条件。
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