血清血浆miRNA提取试剂盒
描述:
血清血浆 miRNA 提取试剂盒是目前提取小RNA(<200nt)操作步骤 、重复性 、小 RNA 产率 的方法之一。使用该试剂盒通过一步上柱即可获得高纯度 miRNA,可在 10min 左右完成小 RNA 的提取;且使用该试剂盒提取的小 RNA(Small RNA)中,长度在 15~200nt范围的 RNA 在 95%以上,基本不含有大 RNA 和 DNA,可直接用于后续的反转录、Northern 杂交、测序等应用。
储存:室温可保存 2 年。
使用防护建议:Serum/Plasma miRNA Reagent 溶液中含有胍盐,其具有强烈的腐蚀性,试验时请务必佩戴防护眼镜、手套、口罩等防护措施,如有皮肤接触请立即用大量清水冲洗,再另行就医。
自备试剂:异丙醇、乙醇、75%异丙醇、2ml EP 管
操作方法:
(1) 向 1.5ml EP 管中加入 800μl Serum/Plasma miRNA Reagent。将 300μl 血清或血浆样本加入到上述 800μl miRNA Reagent A 中,用腕力混匀 30s,室温放置 5min。
(2) 13,000rpm 离心5min,将上清约 1ml 吸入到新的 2ml EP管中。加入 1ml 异丙醇,上下颠倒混合均匀。
(3) 将上述溶液分三次加至吸附柱中(每次约 700μl),13,000rpm 离心 15s,倒掉过柱液。
(4) 向吸附柱中加入700μl 75%异丙醇洗涤一次,13,000rpm离心 15s,倒掉过滤液。
(5) 向吸附柱中加入 500μl 无水乙醇洗涤一次,13,000rpm离心 15s,倒掉过滤液。
(6) 吸附柱 13,000rpm 空离心 2min,去掉残留的乙醇。
(7) 将吸附柱放入到新 1.5ml EP 管中,室温放置 2min,使残留乙醇挥发。在吸附柱滤芯上加入 30μl RnaseFree H2O,室温静置 2min,13,000rpm 离心 2min,洗脱产物即为提取的 miRNA。(通常取 10μl 该产物,即可使用新血清血浆专用 TaqMan miRNA RT kit 进行反转录反应
临床诊断。严禁用于临床医疗及其他非科研用途!以实际收货产品说明书为准,网站说明书仅供参考。
...