HG TaqMan miRNA反转录试剂盒

描述：

TaqMan miRNA 反转录试剂盒采用加 A法进行反转录，加 A 法的反转录效率远高于茎环法，因此，采用该方法可极大的提高检测灵敏度（原理见图 1）。该试剂盒操作简单，仅需要两步即可轻松完成 miRNA 的cDNA 合成，合成的 cDNA 可用于所有 miRNA 的后续定量检测。反转录完毕后采用特异性的上游引物和接头引物进行 PCR 扩增，FAM 标记 TaqMan 探针作为荧光报告基团进行定量检测（原理见图 1）。
HaiGene 的 TaqMan miRNA 反转录试剂盒专用于miRNAs 分子的反转录试验，转录获得的 cDNA 产物用于TaqMan 定量 PCR 方法检测 miRNAs 分子（仅适用HaiGene TaqMan miRNA 定量 PCR 试剂盒）。

组分

储存：请置于-20°C，可保存 2 年；避免反复冻融 
操作方法
1 按以下组分在 0.2 ml EP 管中配制应液

注意：不建议使用 Total RNA，Total RNA 试验结果通常差于 miRNA。

3 反应完毕后，在上述 5μl 反应体系中加入如下试剂，并混合均匀。

获得的 cDNA 产物可用于多个目标 miRNA 的检测。反转录完毕后获得的 miRNA cDNA，可加入 20~80μl ddH20 稀释2~5 倍，通常取 2μl 即可用于 HG TaqMan miRNA 定量 PCR试剂盒检测(该试剂盒有一万余种，详细列表可查询 HG TaqMan miRNA qPCR kit.xls)。

5 利用 HG TaqMan qPCR Kit 对上述 miRNA cDNA 产物进行 RealTime PCR 检测内参基因可选择使用：TaqMan RNU6B miRNA 定量 PCR 试剂盒适用于人、鼠等哺乳动物组织、细胞样品；TaqMan hsa-miR16 miRNA 定量 PCR 试剂盒(适用于来源于人、鼠全血样品。

5.1 配制反应体系(20μl) 

（收集信号采用 FAM 染料通道，Rox 矫正信号选择 None）
5.3 反应结束后确认 Real-Time PCR 的 cDNA 样品和 NTC阴性对照的扩增曲线。