RTS DH5a感受态细胞
描述:
RTS(Room Temperature Stable)系列感受态细胞为 的化学感受态专利技术制备,其室温可保存 3 天、-20°C 可保存 2 年(推荐保存温度)、-80°C 可长期保存性能无下降。运输过程中无需干冰,可常规冰袋运输(推荐运输温度)。
RTS 克隆感受态细胞均为热激感受态细胞,专用于 TA/平端/酶切连接的载体构建(不可用于无缝克隆载体构建),经 42°C热激 1min 可获得 106~108cfu/μg 效价。该制品使用简单、运输、储存方便。
储存:RTS 系列感受态为干粉形式,均可室温保存 3 天,长期保存-20°C(2 年)。经 Nano E.coli Transfection Reagent 溶解后的感受态必须分装后,并于-60°C 以下保存。溶解后的感受态细胞避免反复冻融,在-60°C 以下可保存 6 个月。
操作方法
1. 从-20°C 冰箱中取出 Nano E.coli Transfection Reagent 融化,放置于冰上。取 300 μl Nano E.coli Transfection Reagent 加入到一支冻干感受态细胞中,并分装到 10 支 1.5 ml EP 管中(每支 30 μl),于-60°C 以下保存(或立即使用)。
2. 将 5 μl 连接产物加入到分装的感受态细胞中,轻弹 EP 管(或枪头轻轻吹打),置于冰上 15min。
3. 置于 42°C 热激 1min 后,迅速置于冰上急冷 2min。
4. 热激完毕后,向上述感受态细胞中加入 450 μL 不含抗生素的 SOC(或 LB)培养基,37°C 振荡(225 rpm)培养 60min。
使质粒上抗性标记基因表达,菌体复苏。
5. 取 200 μL 复苏菌液涂布到含相应抗生素的 LB 琼脂平板表面。
6. 将平板置于 37°C 培养,12~18 小时后可出现菌落。
临床诊断。严禁用于临床医疗及其他非科研用途!以实际收货产品说明书为准,网站说明书仅供参考。